分子篩層析 | 水果好營養
分子篩層析又稱為凝膠過濾層析或體積排阻層析。分子篩層析是利用有一定孔徑範圍的多孔凝膠作為固定相。對混合物中各組分按分子大小進行分離的層析技術。
鎖定[1] 中文名 分子篩層析 外文名 gel filtration 別 名 凝膠過濾 分子篩層析原理 凝膠是一種多孔性的不帶表面電荷[2]的物質,當帶有多種成分的樣品溶液在凝膠內運動時,由於它們的分子量不同而表現出速度的快慢,在緩衝液[3]洗脱時,分子量大的物質不能進入凝膠孔內,而在凝膠間幾乎是垂直的向下運動,而分子量小的物質則進入凝膠孔內進行“繞道”運行,這樣就可以按分子量的大小,先後流出凝膠柱,達到分離的目的。 分子篩層析種類與性能表1-8 Sephadex1的種類與特性
G25、G50有四種顆粒型號:粗(100µ~300µ)、中(50µ~150µ)、細(20µ~80µ)和超細(10µ~40µ)。G75~G200[4]又有兩種顆粒型號:中(40µ~120µ),超細(10µ~40µ)。顆粒越細,流速越慢,分離效果越好。表1-9 DEAE-纖維素與Sephadex1比較
分子篩層析試驗方法 分子篩層析凝膠的選擇 根據層析[5]物質分子量的大小選擇不同型號的凝膠,如除鹽[6]和除遊離的熒光素[7],則可選用粗、中粒度的G28或G500,G250多用於分離蛋白質單體,G200多用於分離蛋白質凝膠聚合體等。 分子篩層析凝膠預處理稱取適量的凝膠加入過量的緩衝液在冰箱(或室温)中充分膨脹,或在沸水中煮,膨脹時間應根據不同型號的凝膠而定( )。
為使粒子均勻一致需進行浮選,即加入凝膠粒子後,輕輕攪拌,靜置[8]20min,傾去沉澱的粒子,如此反覆數次即可。 分子篩層析裝柱 ...
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