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在使用原核細胞(如大腸桿菌)或真核細胞(如酵母菌、昆蟲細胞或哺乳動物細胞)大量表現重組蛋白質時,通常會在目標蛋白基因的末端銜接上一段特殊可辨識的標籤序列(如 His-tag 或 GST-tag),以便後續藉由親和性層析技術純化取得目標蛋白進行結構或功能分析。
His-tag 標籤通常是由 6~9 個 Histidine 胺基酸所組成,由於 His-tag 標籤短小(常用的 6x-His tag 標籤分子量約僅有 0.8 kDa)不易影響目標蛋白質的摺疊構形,且能夠非常容易地藉由螯合有二價陽離子的層析膠體純化分離出來,因此成為目前最廣為使用的重組蛋白質融合標籤之一。
His-tag fused N or C terminal of the recombinant protein.
常見的 His-tag 蛋白質純化膠體包含鎳離子 (Ni²⁺) 或鈷離子 (Co²⁺) 螯合膠體,一般來說使用鎳離子螯合膠體可以取得較多的純化蛋白質產量,鈷離子螯合膠體則可以提供更佳的純化蛋白質純度。以下就為您整理報導最受科研人員們所青睞的 His-tag 蛋白質純化實驗明星商品。
Ni-NTA Affinity Resin - Amintra
由 Expedeon (part of abcam) 所開發的 Ni-NTA Affinity Resin - Amintra (ab270549)[1] 能夠自細胞溶解物中快速有效地純化出融合有 His-tag 標籤的重組蛋白,其產品特點包含:
高蛋白質結合力 >40 mg 6x His-tagged protein 天然 (native) 或變性 (denature) 條件皆可適用 純化產物適用於蛋白質結構解析或功能活性分析等實驗
SDS-...
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