谷类作物种子中赖氨酸含量的测定 | 水果好營養
![谷类作物种子中赖氨酸含量的测定](https://i.imgur.com/Dp6k9gg.jpg)
一、原理:.谷物蛋白中赖氨酸残基有自由的ε-NH2,它与茚三酮(ninhydrin)试剂可发生颜色反应, ...
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蛋白质中赖氨酸(lysine,Lys)的含量是谷物品质的主要指标之一。由于动物及人类不能合成,须从食物中得以补充,为此培育高含量赖氨酸的谷物,对于提高营养价值有重要意义。本文介绍了使用茚三酮显色法来检测谷类作物种子中赖氨酸[1]含量的原理、实验流程以及实验注意事项,欢迎收藏。关于染料结合法(DBL)可以参考《谷类作物种子中赖氨酸含量的测定-染料结合法(DBL)[2]》
一、原理:
谷物蛋白中赖氨酸残基有自由的ε-NH2,它与茚三酮(ninhydrin)试剂可发生颜色反应,生成紫红色物质,其颜色与赖氨酸残基的数目成正相关。
选用碳原子数目与赖氨酸相同的亮氨酸,配成标准溶液,做出标准曲线,可用以测定谷物蛋白内赖氨酸的含量。
二、材料、仪器设备及试剂
(一)材料
不同品种的玉米种子,用粉碎机粉碎,过100目筛子,收集过筛后的细粉,放人广口瓶内,加人沸程60~90C的石油醚,使其淹过粉面,浸泡8h,不时搅动进行脱脂。然后过滤,并用石油醚淋洗沉淀若干次,弃去滤液。将脱脂玉米粉晾在干净的滤纸上,置阴凉通风处吹干石油醚。收集干粉,置干燥器内,保存备用。
(二)仪器设备
722型分光光度计,水浴锅,试管,圆头玻璃棒(圆头大小要与试管大小配套)。
(三)试剂
(1)缓冲溶液,称取30g甲酸钠,溶解于约60mL蒸馏水中,加入10mL8%的甲酸,最后加水到100mL。 (2)茚三酮试剂:称取1g茚三酮和1g氯化镉(CdCl2.H20),加入25 mL上述缓...
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