凱氏定氮法 | 水果好營養
![凱氏定氮法](https://i.imgur.com/Dp6k9gg.jpg)
凱氏定氮法是測定化合物或混合物中總氮量的一種方法。即在有催化劑的條件下,用濃硫酸消化樣品將有機氮都轉變成無機銨鹽,然後在鹼性條件下將銨鹽轉化為氨, ...
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蛋白質[1]是含氮[2]的有機化合物。食品與硫酸[3]和催化劑[4]一同加熱消化,使蛋白質分解,分解的氨與硫酸結合生成硫酸銨。然後鹼化蒸餾使氨游離,用硼酸吸收後再以硫酸或鹽酸標準溶液滴定,根據酸的消耗量乘以換算係數[5],即為蛋白質含量。
1.有機物中的氮在強熱和CuSO4,濃H2SO4作用下,消化生成(NH4)2SO4反應式為:
2NH2(CH2)2COOH+13H2S04=(NH4)2S04+6C02+12S02+16H22.在凱氏定氮器中與鹼作用,通過蒸餾[6]釋放出NH3,收集於H3BO3溶液中反應式為:
(NH4)2SO4+2NAOH=2NH3+2H2O+NA2SO4
2NH3+4H3BO3=(NH4)2B4O7+5H2O
3.用已知濃度的HCI標準溶液滴定,根據HCI消耗的量計算出氮的含量,然後乘以相應的換算因子[7],既得蛋白質的含量 反應式為: (NH4)2B407+H2S04+5H20=(NH4)9SO4+4H2BO2
(NH4)2B4O7+2HCl+5H2O=2NH4Cl+4H3BO3
試劑所有試劑均用不含氨的蒸餾水[8]配製。 2.1硫酸銅[9]。 2.2硫酸鉀。 2.3硫酸。 2.42%硼酸溶液[10]。 2.5混合指示液:1份0.1%甲基紅[11]乙醇溶液與5份0.1%溴甲酚綠乙醇[12]溶液臨用時混合。也可用2份0.1%甲基紅乙醇溶液與1份0.1%次甲基藍[13]乙醇溶液臨用時混合。 2.640%氫氧化鈉溶液。 2.70.05N硫酸標準溶液[14]或0.05N鹽酸標準溶液。
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