純化蛋白質與胜肽的水解 | 水果好營養
為順利產生這樣的數據,一定要將蛋白質/胜肽分解或水解成單個胺基酸成分。...將蛋白質濃度(µg/µL)乘以鹽的重量濃度(濃度xMW)就能計算出固體總量。
2.1.6 汽相酸水解對於相對純淨且幾乎不含顆粒物質的蛋白質或胜肽樣品,建議採用汽相水解。這是靈敏度最高的方法。進行這類水解時,最好使用獨立式的自動水解工作站。程序中所需的真空控制、溫度保持、氮氣沖洗以及樣品乾燥等步驟,最好能以自動系統進行,例如第4節所述的Eldex水解工作站。
試劑:
6 N HCl,含1%苯酚(按體積計算) 氮氣(預純化級) 乾冰註:如需詳細的試劑資訊,請參閱水解工作站的操作手冊。
程序(以使用自動工作站為準):
在6 x 50 mm水解試管中乾燥一份含0.5–20 µg蛋白質的等分試樣。 將200 µL含0.5%苯酚的常沸HCL添加至真空瓶的底部(見下方提示)。 交替完成三次抽真空-氮氣沖洗步驟後,在真空狀態下密封真空瓶。 在112–116 °C下水解24小時。 待真空瓶冷卻;以實驗室紙巾擦掉試管外側多餘的HCI;在真空狀態下乾燥。提示:
使用結晶酚,並將一塊結晶(約0.5 mg)放在真空瓶底部。結晶比液態酚更乾淨,也更穩定。 小心地將樣品和內標準品移入試管底部;使用注射筒移液更為準確且容易。 您可以用銼刀或尖頭鉛筆在試管上劃線做記號。 避免HCl液滴流入管內。將試管筆直放入真空瓶中。若試管數量不足10–12支,可以加入空試管支撐。冷卻時讓真空瓶保持微傾會比較好。註:水解後,HCl溶液通常會變成棕色。這是由苯酚而來。使用乙醇或丙酮即可充分消除真空瓶和上部的變色部分。
小心:要區分水解造成的問題與衍生化造成的問題未必容易。
使用Waters AccQ•Tag化學品進行胺基酸衍生化 | 水果好營養
全脂鮮乳平均值水解胺基酸總量含量多少? | 水果好營養
水解簡介 | 水果好營養
純化蛋白質與胜肽的水解 | 水果好營養
胺基酸 | 水果好營養
胺基酸分析前處理 微波蛋白質水解技術分享 | 水果好營養
胺基酸性質 | 水果好營養
胺基酸的定量 | 水果好營養
食品與飼料樣品的水解 | 水果好營養
(4043)胺基酸分析法 | 水果好營養
筆柿水解胺基酸總量含量多少?
筆柿俗稱:柿子,柹,香柿(長柿,珍寶柿,筆干柿),水解胺基酸總量有多少呢?本篇為大家整理筆柿胺基酸組成資訊:樣品名稱:筆柿...
意大利葡萄麩胺酸(Glu)含量多少?
意大利葡萄俗稱:蒲桃,蒲萄,草龍珠,蒲陶,葡桃,麩胺酸(Glu)有多少呢?本篇為大家整理意大利葡萄胺基酸組成資訊:樣品名稱:...
蜜棗李(進口)麩胺酸(Glu)含量多少?
蜜棗李(進口)俗稱:李子,麩胺酸(Glu)有多少呢?本篇為大家整理蜜棗李(進口)胺基酸組成資訊:樣品名稱:蜜棗李(進口)俗名:...
蟠桃丙胺酸(Ala)含量多少?
蟠桃俗稱:餅桃,丙胺酸(Ala)有多少呢?本篇為大家整理蟠桃胺基酸組成資訊:樣品名稱:蟠桃俗名:餅桃樣品英文名稱:Peach內...
圓果金柑絲胺酸(Ser)含量多少?
圓果金柑俗稱:金桔,金橘,桔子,絲胺酸(Ser)有多少呢?本篇為大家整理圓果金柑胺基酸組成資訊:樣品名稱:圓果金柑俗名:金...
楊桃(11月取樣)絲胺酸(Ser)含量多少?
楊桃(11月取樣)俗稱:羊桃,洋桃,陽桃,五稜子,五斂子,絲胺酸(Ser)有多少呢?本篇為大家整理楊桃(11月取樣)胺基酸組成資訊:...
李子平均值(紅皮紅肉)絲胺酸(Ser)含量多少?
李子平均值(紅皮紅肉)俗稱:李子,絲胺酸(Ser)有多少呢?本篇為大家整理李子平均值(紅皮紅肉)胺基酸組成資訊:樣品名稱:李...
紅甘蔗汁色胺酸(Trp)含量多少?
紅甘蔗汁俗稱:甘蔗,色胺酸(Trp)有多少呢?本篇為大家整理紅甘蔗汁胺基酸組成資訊:樣品名稱:紅甘蔗汁俗名:甘蔗樣品英文...
蓮霧平均值(粉紅色種)絲胺酸(Ser)含量多少?
蓮霧平均值(粉紅色種)俗稱:璉霧,輦霧,爪哇蒲桃,絲胺酸(Ser)有多少呢?本篇為大家整理蓮霧平均值(粉紅色種)胺基酸組成資訊...
甜蜜蜜鳳梨水解胺基酸總量含量多少?
甜蜜蜜鳳梨俗稱:旺來,波羅,黃萊,黃梨,王萊(台農16號),水解胺基酸總量有多少呢?本篇為大家整理甜蜜蜜鳳梨胺基酸組成資訊:...
可可椰子汁(進口)絲胺酸(Ser)含量多少?
可可椰子汁(進口)俗稱:椰子汁,越王頭汁,絲胺酸(Ser)有多少呢?本篇為大家整理可可椰子汁(進口)胺基酸組成資訊:樣品名稱:...
紅寶石洋香瓜水解胺基酸總量含量多少?
紅寶石洋香瓜俗稱:甜瓜,甘瓜,果瓜,香瓜,梨仔瓜,澎湖瓜,洋香瓜,網仔瓜,哈蜜瓜,水解胺基酸總量有多少呢?本篇為大家整理紅寶...
黃香瓜脯胺酸(Pro)含量多少?
黃香瓜俗稱:甜瓜,甘瓜,果瓜,香瓜,梨仔瓜,澎湖瓜,脯胺酸(Pro)有多少呢?本篇為大家整理黃香瓜胺基酸組成資訊:樣品名稱:黃...
胭脂梅絲胺酸(Ser)含量多少?
胭脂梅俗稱:梅子,絲胺酸(Ser)有多少呢?本篇為大家整理胭脂梅胺基酸組成資訊:樣品名稱:胭脂梅俗名:梅子樣品英文名稱:Y...
新世紀哈密瓜水解胺基酸總量含量多少?
新世紀哈密瓜俗稱:,水解胺基酸總量有多少呢?本篇為大家整理新世紀哈密瓜胺基酸組成資訊:樣品名稱:新世紀哈密瓜俗名:樣...